指南-长ssDNA生产系统v2
该指南-it长ssDNA生产系统v2可按需生产长度达5000 nt的长单链DNA (ssDNA),用于涉及CRISPR/Cas9技术或其他基因组编辑工具的敲入实验中作为修复模板。本试剂盒提供了一种简单、快速的方法,通过选择性的酶切,将任何序列的dsDNA PCR产物转化为ssDNA。每个试剂盒可制备50个ssDNA模板。
该指南-it长ssDNA生产系统v2可按需生产长度达5000 nt的长单链DNA (ssDNA),用于涉及CRISPR/Cas9技术或其他基因组编辑工具的敲入实验中作为修复模板。本试剂盒提供了一种简单、快速的方法,通过选择性的酶切,将任何序列的dsDNA PCR产物转化为ssDNA。每个试剂盒可制备50个ssDNA模板。
尽管ssDNA模板在利用同源性直接修复(HDR)进行精确基因组编辑应用时,已被证明比dsDNA模板具有几个重要优势(Roth等人,2018),但长ssDNA的使用由于其生产的难度和成本而受到限制。指南-它长的ssDNA生产系统v2的目的是使ssDNA模板的好处,通过提供一个有效的,经济的方法,以获得所需的ssDNA的所有研究人员。
使用ssDNA作为模板优于dsDNA的好处:
- 显著减少随机和脱靶集成,提高了基因编辑效率,降低了实验造假的可能性
- 最小的细胞毒性,可以恢复更多的编辑细胞
- 可忽略的转基因表达从非整合模板,允许更容易识别正确编辑的克隆
概述
- 按需生产ssDNA供体模板五百至五千元不等基因敲入应用
- 简单快速的协议只需要几个小时就可以完成
- 极大地减少了脱靶集成与dsDNA模板相比
- 最小的细胞毒性,从而提高了编辑细胞群的生存能力
更多的信息
该指南-it长ssDNA生产系统v2包括改进,使更有效地处理具有挑战性的模板,提供更高的ssDNA产量,并允许一个更简单的协议,与我们的第一代ssDNA试剂盒(Cat。# 632644, 632645)。*
![](http://www.yamajr.com/products/gene-function/gene-editing/crispr-cas9/images/320-Gene_Editing/CC-TechFigs/GuideIt-Long-ssDNA_8777_PP.jpg)
改进的一代ssDNA与指南-it长ssDNA生产系统v2。凝胶图像显示dsDNA起始材料(巷1)和感觉(SS)或反义(AS) ssDNA产品的几个HDR模板生成使用指南-it长ssDNA生产系统(巷2和巷3,分别)的原始(v1)或更新(v2)版本。本分析中包含的dsDNA模板被鉴定为使用v1 Guide-it试剂盒生成ssDNA的具有挑战性的底物。以溴化乙锭为染色剂,用琼脂糖凝胶电泳分析dsDNA和ssDNA。ssDNA产物比相应的dsDNA底物具有更小的分子量。在所有情况下,指南-它长的ssDNA生产系统v2产生了一个更干净的ssDNA带比以前的试剂盒版本,表明更完整和统一的消化。
*请注意,随着指南-它长的ssDNA生产系统v2的推出,原始的指南-它的ssDNA套件(猫。# 632644,632645)已停产。
更多的产品信息
有关存储条件、产品部件、技术规格等信息,请参见产品分析证书。请参阅套件组件清单确定套件组件。分析证书和套件组件清单位于“文档”页签下。
选择HDR模板格式
观看关于如何为敲入实验选择正确的HDR模板的网络研讨会。
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