SARS-CoV-2假型慢病毒的简化生产
发展新冠病毒-19疗法的一个共同目标是证明对SARS-CoV-2感染的抑制作用。考虑到处理活SARS-CoV-2所需的安全措施,研究人员通常使用带有SARS-CoV-2棘突蛋白的替代病毒(ni等人。2020年,Shang等人,2020年)。为了支持这些努力,我们对我们的Lenti-X包装系统进行了改造,以方便的形式实现了高滴度的棘突假型慢病毒颗粒的生产,并开发了伴随细胞系稳定表达人ACE2受体。
发展新冠病毒-19疗法的一个共同目标是证明对SARS-CoV-2感染的抑制作用。考虑到处理活SARS-CoV-2所需的安全措施,研究人员通常使用带有SARS-CoV-2棘突蛋白的替代病毒(ni等人。2020年,Shang等人,2020年)。为了支持这些努力,我们对我们的Lenti-X包装系统进行了改造,以方便的形式实现了高滴度的棘突假型慢病毒颗粒的生产,并开发了伴随细胞系稳定表达人ACE2受体。
包装系统可用于生产带有六种不同SARS-CoV-2棘突蛋白变体的病毒颗粒:
- WT(全长)来源于新冠状病毒SARS COV-2的武汉-H-1分离株(NCY045 512 2),密码子优化用于哺乳动物细胞的表达
- D614G(全长)-包括棘突蛋白编码序列中的D614G突变;自新冠病毒-19大流行开始以来,这种突变的流行率迅速上升(Isabel等人,2020年)
- B.1.351(全长)从南非最初确定的SARS-COV-2变体(20h / 501.v2);从枕头或疫苗的个体血清中和血清中和的易感性降低相关(Madhi等.2021)
- wt(被截断),D614G(截断),和B.1.351(截断)-截短WT峰、D614G峰和B.1.351峰编码序列,包括从C端去除19个氨基酸;截短与产生的颗粒上的棘突蛋白丰度增加以及颗粒传染性增加有关(Johnson等人,2020年)
为方便起见,Lenti-X SARS-CoV-2包装混合物也单独出售。
参考
倪,L.等。SARS-CoV-2特异性体液和细胞免疫在恢复期患者中的检测。免疫.52, 971–977 (2020).
尚,J.等。SARS-COV-2的细胞进入机制。《美国科学院院刊》.117, 11727–11734 (2020).
Isabel,S.等人,《SARS-CoV-2 D614G棘突蛋白突变的进化和结构分析》现已在世界范围内得到证实。Sci代表.10, 14031 (2020).
Madhi,S.等。Chadox1 NCoV-19 Covid-19疫苗对B.1.351变体的疗效。英国医学杂志。384,1885-1898(2021年)。
约翰逊,MC。等等。SARS-COV-2穗糖蛋白的优化伪型条件。维罗尔.94.,e01062-20(2020年)。
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