现在可以从单个细胞中扩增DNA来获得高度可复制的文库:PicoPLEX全基因组扩增(WGA)技术是为从单个细胞开始扩增单个拷贝基因组DNA而设计和优化的。易于使用的单管协议减少了处理错误,极大地提高了结果的时间,并减少了后台。的Picoplex WGA套件该工作流程已成功应用于qPCR、阵列和下一代测序的广泛应用。
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单细胞的全基因组扩增
现在可以从单个细胞中扩增DNA来获得高度可复制的文库:PicoPLEX全基因组扩增(WGA)技术是为从单个细胞开始扩增单个拷贝基因组DNA而设计和优化的。易于使用的单管协议减少了处理错误,极大地提高了结果的时间,并减少了后台。的Picoplex WGA套件该工作流程已成功应用于qPCR、阵列和下一代测序的广泛应用。
一个三步单管反应从裂解1-15个细胞开始。然后DNA作为模板,使用准随机引物方法进行预扩增,创建一个发夹分子库。这些发夹,反过来,直接放大成大量的DNA,可以用于广泛的下游应用。
采用PicoPLEX单细胞WGA技术扩增流式分选的癌细胞。每一个细胞(蓝线)以相同的速率扩增,结果是相似的,可预测的产量。5个细胞的合并样本(红线)为阳性对照。包含0细胞的样品(绿线;没有模板控制)显示非常低的背景。
使用皮卡索单细胞WGA技术扩增单粒状活组织检查,标记为BluegNome的24次阵列在Genesis Geetics Institute中杂交。注意CNV的清晰指示。2011年,伊斯尔临床试验确认了使用皮片技术的核型分析的准确性。
利用基因座特异性qPCR对独立单细胞文库中的48个基因座进行定量分析。数据显示了使用PicoPLEX单细胞WGA技术、GenomePLEX和GenomiPhi(从左到右)扩增的两个个体样本的DNA结果,使用的DNA为10 pg。来自PicoPLEX单细胞WGA技术的产品中,90%以上的产品产生了可识别的、高度可重复的人类序列。
“[PicoPLEX技术]代表了扩增技术的重大进步……我们选择[PicoPLEX]是因为它的协议快速,具有高度代表性的扩增,与其他扩增方法相比,等位基因退出率低。”
- Nick Haan,创始人,Bluegnome
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