- 需要25bb矢量插入
- 低易解式脱氧核糖核酸聚合物填充克隆交叉点
- 悬浮克隆机制
Gibson方法使用三酶混合从线性脱氧核糖核酸碎片到成品金字塔与其他无缝克隆方法一样,插入通过PCR放大,包括线性向量或其他相邻碎片的同质重叠所需重叠比Fusion克隆(见下文)长,建议定在25b线性碎片编译后 5'exuncle最近的NEBUUDER HIFi脱氧核糖核酸大会使用同样的技术,但依赖高易燃聚合酶补缺Gibson方法的两个版本中 脱氧核糖核酸在变换前封存技术产生方向性无疤克隆易出错因基联不匹配后台因使用ligase而高提升高通量项目时,应注意潜在的误差率和背景水平,因为当克隆数增加时这些问题会放大