阿尔茨海默病免疫抗体工程
许多神经退行性疾病的特征是脑组织中特定蛋白的异常积累。在阿尔茨海默病中,这些聚集物由淀粉样斑块和神经原纤维缠结组成(分别由淀粉样β [Aβ]和tau蛋白组成)。由于a β和tau都是神经毒性的,往往与认知能力下降相关,并诱导炎症,目前的模型表明,它们的聚集引发了下游病理的级联,驱动神经变性,并最终导致阿尔茨海默病(Bloom 2014;Laurent, Buée, and Blum 2018)。
因此,这些蛋白聚集物是一个有吸引力的治疗靶点。临床研究的一个主要推动力是抗Aβ和最近抗tau抗体的开发和测试。虽然该领域经历了挫折(Honiget al。, 2018;Selkoe 2019),越来越多的抗体已进入临床试验(卡明斯评论et al。2018年),并提供了希望,即清除这些聚集物可能阻止并有可能逆转这种使人衰弱的疾病的进展。为了促进这项工作,我们提供了简单、快速、高通量抗体生成和纯化的端到端的抗体工程解决方案。
突出产品
更智能的抗体可变区扩增
我们的聪明的比赛用品利用我们独特的SMART (年代巫术米助力一个在5'末端RNATEMPLACT)技术提供原始重(H),κ轻链[L(κ)]的真实表示,或λ轻链[L(λ)] mRNA转录物从总RNA的大小到10 ng(图1)。与许多其他种族PCR方法不同,我们的更智能的竞争技术捕获了转录物的5'末端,并加上5'末端的智能序列加上,提供全长,均匀的基因身体覆盖。这种优化的技术具有稳健性,吹嘘较低的背景和高扩增效率,并且即使对于用GDNA污染的样品也可以使用。最后,为了简化您的工作流程,这些套件包括我们专有的融合克隆技术(见下文),以方便快速,高度准确地克隆您的竞争碎片。
图1.抗体5'种族的实验工作流程概述,抗体可变域的比赛。
高效、高通量产生抗体结构
我们的融合高清克隆加通过允许快速生成和筛选功能性克隆,该技术(图2)增强了抗体发现和工程流程。筛选个体克隆通常是抗体工程工作流程中最耗时的步骤之一。然而,与传统的基于连接的方法不同,In-Fusion克隆效率高,背景极低,单插入克隆的>95%的成功率。我们的in - fusion技术也非常快速(15分钟)和无缝,允许在一次反应中将多个PCR片段定向克隆到任何目的载体。由于这些好处,我们的In-Fusion技术已经为多个高通量抗体克隆工作流程提供了动力(Chenet al。2014;孟et al。2015;Spidelet al。2016;Rudkinet al。2018)。
图2。融合内克隆工作流概述。
在从您的表达结构中生成抗体后,我们的下一代Capturem纯化技术能够在5-15分钟内快速、高质量和高通量的抗体纯化。Capturem柱和板块是无树脂的,利用高容量的尼龙膜系统(图3),包含固定蛋白a或G(图3),允许从复杂的起始样品(如杂交瘤上清液和血清)直接纯化抗体。这些技术有多种格式(微型预聚体、最大预聚体、24孔板和96孔板),非常适合快速、高通量筛选抗体克隆。
图3.详细介绍Capturem高容量膜内部的图像。
为AD及Αβ和tau靶向抗体的研制提供参考
Bloom, G. S. β淀粉样蛋白和tau蛋白。JAMA神经。71年,505(2014)。
康明斯,J., Lee, G., Ritter, A. & Zhong, K., K.阿尔茨海默病药物研发计划:2018年。阿尔茨海默氏症痴呆症。(纽约,纽约)4,195 - 214(2018)。
韩起澜,l·S。et al。索兰单抗治疗阿尔茨海默病所致轻度痴呆的试验。n.ngl。J.Med。378年,321 - 330(2018)。
Tau和神经炎症:对阿尔茨海默病和Tau病有什么影响?生物医学。J。41,21-33(2018)。
阿尔茨海默病和aducanumab:调整我们的方法。Nat,启神经。15,365 - 366(2019)。
文献引用In-Fusion HD Cloning用于高通量抗体克隆
陈,C.-G。通过一步零背景IgG重组噬菌体显示的抗体片段,实现快速和高通量先导物鉴定。核酸Res。42,e26-e26(2014)。
孟,W。et al。从恒河猴单个抗体分泌细胞高效生成单克隆抗体。马伯7,707-18(2015)。
Rudkin, f M。et al。单人B细胞衍生的单克隆抗 -假丝酵母抗体增强吞噬作用并防止散发念珠菌病。Commun Nat。9,5288(2018)。
陈媛媛,陈玉英,陈玉英,陈玉英,陈玉英。HEK293细胞中抗体的快速高通量克隆和稳定表达。j . Immunol。方法439年,- 58(2016)。
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